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HPLC色谱柱样品的前处理和流动相的配制概要

发布于 2015/11/04阅读(2503)来源 上海本昂

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HPLC色谱柱样品的前处理和流动相的配制概要
样品的前处理
1、好使用流动相溶解样品。 
2、使用予处理柱除去样品中的强极性或与柱填料产生不可逆吸附的杂质。
3、使用0.45μm(或0.45μm以下)的过滤膜过滤除去微粒杂质。

流动相的配制
液相色谱是样品组分在柱填料与流动相之间质量交换而达到分离的目的,因此要求流动相具备以下的特点:
1、流动相对样品具有一定的溶解能力,保证样品组分不会沉淀在柱中(或长时间保留在柱中)。2、流动相具有一定惰性,与样品不产生化学反应(特殊情况除外)。 
3、流动相的黏度要尽量小,以便在使用较长的分析柱时能得到好的分离效果;同时降低柱压降,延长液体泵的使用寿命(可运用提高温度的方法降低流动相的黏度)。 
4、流动相的物化性质要与使用的检测器相适应。如使用UV检测器,最好使用对紫外吸收较低的溶剂配制。 
5、流动相沸点不要太低,否则容易产生气泡,导致实验无法进行。 
6、在流动相配制好后,一定要进行脱气。除去溶解在流动相中的微量气体既有利于检测,还可以防止流动相中的微量氧与样品发生作用。

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